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注：終止液和顯色劑具有腐蝕性，一旦接觸到液體，請盡快用大量清水沖洗。
產品介紹 Human TSLP ELISA Kit (Human Thymic Stromal Lymphopoietin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即人胸腺基質淋巴細胞生成素 ELISA 試劑盒，可以定量檢測人血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液等樣本中的天然和重組 TSLP 濃度。人胸腺基質淋巴細胞生成素由A、B、C、D 4個螺旋束組成，有2種同型異構體。人與小鼠TSLP氨基酸序列同源性為43%。人上皮細胞和肥大細胞都能產生TLSP。人TSLP mRNA高水平表達于心、肝、睪丸、前列腺；肺、骨骼肌、腎、脾、卵巢、小腸和結腸低水平表達。人TSLP具有多種生物學作用，如通過活化DC，間接促進胸腺Treg的分化；誘導的DC營造Th2型微環(huán)境；2DC啟動Th2型過敏性疾??；2DC維持免疫平衡，避免腸道自身免疫疾病等。由于TSLP 能促進鼠、人類T細胞的發(fā)育，特別是近來發(fā)現人TSLP在胸腺中促進了FoxP3+CD4+CD25+Treg的分化與發(fā)育；而在過敏性疾病的發(fā)病上游它又起著關鍵作用，其生物學功能引起人們的關注。與鼠不同的是，上述功能發(fā)揮,需要預先激活 DC，因此它對于胸腺中T細胞的發(fā)育是間接起作用的；過敏原刺激上皮細胞后，分泌TSLP而激活的DC，后者分泌過敏疾病特殊的Th2型細胞因子前出現臨床癥狀。然而，關于 TSLP發(fā)揮相應作用所通過的信號途徑，目前并不清楚，需要進一步探索與研究。本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測樣品中人TSLP 濃度。在人TSLP單克隆抗體預包被酶標板中加入適度稀釋的樣品和標準品，其中的TSLP會與其單抗結合，洗去游離成分；加入生物素化的抗人TSLP抗體，抗人TSLP抗體與結合在單抗上的人TSLP結合而形成免疫復合物，洗去游離的成分；加入辣根過氧化物酶標記的親合素，生物素與親合素特異性結合，洗去未結合的酶結合物；加入顯色劑，若反應孔中有TSLP，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑出現藍色；加終止液變?yōu)辄S色。在450 nm下測OD值，人TSLP濃度與OD 450值之間呈正比，可通過繪制標準曲線計算出樣品中人 TSLP濃度。
UE-H6138S/H6138M/H6138L◆沒有信號？1.試劑添加順序錯誤或試劑配制不正確。重復實驗；檢查試劑配制方法；復核試驗試劑添加流程。2.HRP被疊氮化合物污染。使用新鮮配制的試劑。3.抗體用量不足。檢查是否使用了推薦的抗體量；增加抗體用量（濃度）。4.使用了含胎牛血清的緩沖液復溶抗體。檢查使用的試劑。5.捕獲抗體與板結合較差。使用ELISA板，而非組織培養(yǎng)板；使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。◆整塊板呈現規(guī)則藍色？1.洗板不充分或跳過洗滌步驟未去除殘留的非結合過氧化物酶。嚴格按照說明書洗滌流程操作。2.底物溶液預混太早不新鮮。底物溶液混合后須立即使用。3.封板膠紙或試劑儲液槽重復使用導致HRP殘留污染。每步均需使用新的封板膠紙或試劑儲液槽。4.緩沖液有金屬或HRP污染。新鮮配置緩沖液。◆標準曲線差？1.鏈親和素-HRP結合物量不足。檢查倍性稀釋是否正確。2.捕獲抗體與板結合較差。使用酶標板，而非組織培養(yǎng)板；使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。3.檢測抗體量不足。檢查稀釋度是否正確。4.孵育時間不足。延長底物溶液孵育時間。5.實驗操作流程有誤。嚴格按照說明書操作流程。6.標準曲線稀釋計算錯誤。重新計算制作新的標準曲線。
